Сироватка шигела, 3 мл, SSI Diagnostica, Данія

Застосування

Імунні сироватки шигели від SSI Diagnostica призначені для серотипування штамів шигели за допомогою реакції аглютинації на предметному склі.

 Опис

Поліклональна імунна сироватка шигели проти дизентерійної палички, шигели Флекснера, та шигели Бойда вирощуються у кроликів. Імунні сироватки проти шигели sonnei це моноклональні антитіла (отримані при імунізації мишей і злиття клітин селезінки з мишачими мієломними клітинними лініями). Імунні сироватки постачаються в пляшках об’ємом 3 мл (азид натрію для збереження).

 Перехресні реакції були виключені шляхом поглинання.

 Принцип

Коли бактеріальну культуру змішують зі специфічною імунною сироваткою, спрямованою проти компонентів зовнішньої мембрани бактерії, клітини поєднуються один з одним через зв'язок антиген-антитіло, щоб утворити скупчення (аглютинація). Це, як правило, видно неозброєним оком у вигляді грудок в суспензії.

Обмеження

Латексний реагент призначений для серотипування чистих культур капсульованих пневмококів.

Матеріали, які необхідні, але не входять до складу набору

• Селективна або неселективна агарова середа (наприклад, м'ясо-пептонний агар)

• Інокуляційна петляабо зубочистка

• Предметне скло

• Фізіологічний розчин, рН 7,4

• Інкубатор 35-37 °C

Процедура

Загальна

Фізіологічний розчин використовують в якості негативного контролю, і він повинен бути негативним. Якщо негативний контроль є позитивним (аглютинація), штам автоматично аглютинує, тобто O шорсткий.

1.       Штам шигели вирощують при 35-37 °С протягом ночі у неселективній або селективній агаровій середі.

2.       Нанесіть невелику краплю імунної сироватки (приблизно 20 мкл) на предметне скло.

3.       Перенесіть культури з декількох колоній до краплі імунної сироватки і добре перемішайте. Кількість культури має бути достатньою, щоб дати виразний мутно-молочний колір. Використовуйте інокуляційну петлю або зубочистку.

4.       Обережно нахиліть скло на 5 - 10 секунд.

5.       Реакція зчитується неозброєним оком, тримаючи скло перед світлом на чорному фоні (непряме освітлення).

6.       Позитивна реакція розглядається як видима аглютинація. Негативна реакція це збереження мутно-молочної однорідності. Пізню або слабку аглютинацію слід вважати негативним результатом.

Проблеми з аглютинацією

Якщо культура шигели аглютинує погано або, якщо зовсім не аглютинує,помістіть її в сольовий розчин і прокип’ятіть на водяній бані протягом 15-30 хвилин. Потім слід охолодити суспензіюі протестувати її в фізіологічному розчині, щоб визначити, чи є вона шорсткою. Якщо суспензія не шорстка, використайте її для визначення аглютинації в імунній сироватці.

Зберігання та термін придатності

Зберігати при температурі 2-8 °С у захищеному від світла місці. Термін придатності зазначений на упаковці. Іноді після тривалого зберігання спостерігається мутність через осадження ліпопротеїнів. Осади та/або забруднення можуть бути видалені за допомогою центрифугування (10 000 г) з подальшою стерильною фільтрацією (0,22 мкм).

Термін поставки: 5 днів

Інформація актуальна: 03.03.2018