Сыворотка Shigella, 2 мл, DENKA SEIKEN, Япония

Shigella это неподвижная грамм-отрицательная палочка, относящийся к семейству Enterobacteriaсeae. Микроорганизмы внутрь попадают в толстый кишечник и поражают эпителиальные клеток, тем самым вызывают шигеллез с (слизистой и кровавую) диареей, лихорадкой и болью в животе как основным жалобами. Shigella разделяют на следующие 4 вида по серологическими особенностями соматического антигена (O-антиген) и биохимическими свойствами согласно рекомендациям (1984) Международного подкомитета по группировки Enterobacteriaeae, основанного по предложению Эвинга в 1949 году - S. dysenteriae (подгруппа A), S. flexneri (подгруппа B) S. boydii (подгруппа C) and S. sonnei (подгруппа D). S. dysenteriae делится на 12 серологических типа по типовому антигеном, S. flexneri на 6 серотипов и 13 подтипов по типовому и групповым антигеном, S. boydii на 18 серотипов по типовиим антигеном. В S. sonnei существует один серотип, который делится на 2 антигены, фаза I (гладкий - S тип) и фаза II (шорохуваты - R тип) связаны с S-R мутацией О-антигену.

Эти продукты представляют собой поливалентные и моновалентные сыворотки для серотипувння Shigella путем агглютинации на стекле, каждая сыворотка содержит специфический агглютинин. Каждая поливалентная сыворотка изготавливается путем гипериммунизации здоровых свиней инактивированными микроорганизмами, нагревают полученную сыворотку при 56 ° С в течение 30 минут, удаляют аналогичные агглютинины путем отсосом и асептически фильтруя их. Что касается одновалентных сывороток, то гипермунизуються здоровые кролики, чтобы получить сыворотку.

ПРОДУКТ

Это редкий продукт, содержащий специфические соматические антитела (поливалентная сыворотка: свиные, моновалентная сыворотка: кроличьи) к О-антигену Shigella и 0.08% азида натрия в качестве консерванта.

Поливалентные шигеллезные сыворотки  2 мл x 8 флаконов

 Правильное использование

Определение серотипов Shigella.

Принцип Определение

Когда этот реагент смешивается с штаммом Shigella с антигеном, соответствует реагента, реакция антиген-антитело вызывает образование агглютинации. Реакция учитывается макроскопически для определения каждого серотипа

Процедура

1. Материалы необходимые, но не предусмотрены

Агаровую среды (питательный агар, агар с сердечной вытяжкой: скошенный или в чашке Петри), физиологический раствор, предметное стекло, карандаш по стеклу, маленькие пробирки, пипетки, микропипетки и наконечники, флуоресцентный свет, бактериологическая петля, термостат (37 ° C).

Если необходимо, автоклав (121 ° C) или водяная баня, центрифуга.

2. Приготовление реагентов

Сыворотки готовы к использованию.

3. Образец

Для серотипирования должны использоваться культуры микроорганизмов, полученных из чистой культуры и идентифицированы как Shigella с помощью биохимических тестов. Если образец состоит из нескольких штаммов, серотип может быть неправильно идентифицирован.

4. Процедура

1) Размешайте определенное количество культуры бактерий (3-5 долек размером с спичечную головку) в 3 мл физиологического раствора и используйте как суспензию антигена.

2) Поместите каплю каждой поливалентной сыворотки и физиологического раствора (30 мкл), как контроль, на очищенное предметное стекло разделено на части карандашом по стеклу.

3) Поместите суспензию антигена (по 5-10 мкл) до сывороток и физиологического раствора на предметном стекле.

4) Смешайте реагенты, наклоняя предметное стекло назад и вперед в течение 1 минуты, и наблюдайте картину агглютинации. Агглютинация макроскопически наблюдается в проходящем свете сквозь стекло, включая люминесцентное свет. Сначала следует подтвердить, что при смешивании суспензии антигена и физиологического раствора не обнаруживается агглютинация. Только сильная агглютинация, которая наблюдается в течение 1 минуты при реакции с каждой сывороткой, должна рассматриваться как положительная. Задержка или слабая агглютинация считается отрицательным результатом.

5) Если образец положительный с поливалентной сывороткой, выполните этап 2) -4), описанные выше, используя каждую моновалентную сыворотку, из которой состоит поливалентная сыворотка.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Агглютинация наблюдается макроскопически в свете проходящего в том числе и флуоресцентном. Сначала следует подтвердить, что при реакции суспензии антигена и физиологическим раствором не обнаруживается агглютинация. Только сильная агглютинация, которая наблюдается в течение 1 минуты реакции с каждой сывороткой, должна рассматриваться как положительная. Задержка или слабая агглютинация считается отрицательной.

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ

1. Антигенные компоненты Shigella широко распространены среди Enterobacteriaceae, особенно среди энтероинвазивные E. coli. Важно чтобы микроорганизм, который будет использован как Shigella был подтвержден биохимическими тестами.

2. Бактериальная культура должна быть выращена с использованием указанных выше сред, неселективных сред. Если используются селективные, продукция антигенов может быть недостаточной, или может возникнуть спонтанная агглютинация

3. Когда суспензию антигена и сыворотку смешивают при процедуре агглютинации на стекле, микробиологическая петля должна быть стерилизована пламенем для каждой сыворотки, чтобы избежать перекрестной контаминации.

4. Если определяется агглютинация в реакции суспензии антигена и физиологического раствора, исследования необходимо повторить после повторно выращивания микроорганизма

5. Некоторые штаммы Shigella не могут быть серотиповани, если используется живая культура. Если штамм идентифицирован как Shigella но отрицательный с поливалентными сыворотками, серотипирования необходимо повторить после термической обработки суспензии антигена.

1) Размешайте определенное количество культуры бактерий (3-5 долек размером с спичечную головку) в 3 мл физиологического раствора и нагревайте при 121 ° C в течение 15 мин или при 100 ° C в течение 1 ч.

2) центрифугируют грита суспензию при 900 g ( «3000 об / мин) в течение 20 мин, отберите надосадочную жидкость, разведите осадок с 0,5 мл физиологического раствора и используйте как суспензию антигена

6. Когда поливалентные сыворотки дают положительный результат, а моновалентные - отрицательный, штамм, проходит тестирование, может быть серотипом, не содержится в этом продукте. После подтверждения биохимических свойств образца, рекомендуется провести консультации с общественным исследовательским заведением.

7. Когда несколько поливалентных и моновалентных сывороток дают положительные результаты, необходимо повторно подтвердить биохимические свойства образца и повторить серотипирования с использованием нагретой суспензии антигена.

8. серотипирования Shigella не должно базироваться исключительно на результатах с поливалентными сыворотками.

ХАРАКТЕРИСТИКИ

1. Чувствительность

Когда одна капля продукта реагирует на стекле с эталонным штаммом известного серотипа, макроскопически наблюдается зернистая агглютинация

2. Специфичность

В испытании, выполненном аналогично теста чувствительности, сыворотки агглютинируются

 Срок поставки: 5 дней

Аналог сыворотки Anti-Shigella

Информация актуальна: 03.02.2018