Набор реагентов «Сыворотки диагностические сальмонеллезные адсорбированные H-поливалентные для реакции агглютинации» предназначен для идентификации с помощью реакции агглютинации (РА) на предметном стекле бактерий рода Salmonella, выделенных из биологического материала человека (моча, испражнения, промывные воды желудка, рвотные массы).

Показания и противопоказания к применению изделия

Набор реагентов «Сыворотки диагностические сальмонеллезные адсорбированные H-поливалентные для реакции агглютинации» предназначен для идентификации бактерий рода Salmonella с целью назначения правильного лечения больного, а также при расследовании вспышек сальмонеллезов и установления источников и факторов передачи возбудителя инфекции.

Сальмонеллёз — острая зоонозная инфекционная болезнь с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя, характеризующаяся преимущественным поражением ЖКТ, развитием интоксикации и обезвоживания.

Сальмонеллы — грамотрицательные палочки рода Salmonella семейства Enterobacteriaceae.

Основным методом для подтверждения наличия сальмонелл является бактериологический (выделение и идентификация возбудителя с помощью питательных сред, биохимических тестов, серологических исследований). Материалом для исследований могут служить испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, а при необходимости моча, кровь, желчь и другие выделения из пораженных органов больных. В особых случаях (вспышки сальмонеллезов) диагноз может быть поставлен на основе клинико-эпидемиологических данных с дополнительными позитивными результатами серологических (РПГА, ИФА, РНГА) и молекулярно-генетических (ПЦР) исследований.

В практической работе для серологической идентификации сальмонелл проводят исследование по О, Н- и Vi-антигенам. Серологическую идентификацию сальмонелл начинают с испытания их в реакции агглютинации (РА) на стекле с агглютинирующей адсорбированной поливалентной сывороткой к сальмонеллам групп (А, В, С, Д, Е), а в случае получения отрицательного результата с агглютинирующей адсорбированной поливалентной сывороткой к сальмонеллам редких групп. При получении положительных результатов агглютинации со смесью О-сывороток, культуру испытывают с каждой О-сывороткой, входящей в смесь. После установления принадлежности культуры к одной из О-групп, выявляют наличие дополнительных О-антигенов, присущих представителям указанной группы. После этого проводят реакцию агглютинации с Н-сыворотками. При этом вначале используют Н-сыворотки, соответствующие Н-антигенам 1 фазы, а потом Н-антигенам 2 фазы. Начинают с Н-сывороток, соответствующих более распространенным сероварам данной группы.

Описано более 2400 патогенных сероваров сальмонелл, вызывающих у человека острые гастроэнтериты, тифоподобные и септикопиемические формы заболевания, объединенных под названием сальмонеллез. Основными возбудителями сальмонеллеза являются Salmonella сероваров enteritidis, typhi murium, cholerae-suis, haifa и т.д. 

СКЛАД І КОМПЛЕКТАЦІЯ НАБОРУ

Постановка РА на стекле

Перед проведением анализа выдержать все реагенты не менее 30 минут при температуре от 18 до 25 ^оС.

Сухую сыворотку растворяют в 2 мл 0,9% водного раствора хлористого натрия.

На предметное стекло наносят одну каплю (около 40 мкл) сыворотки и одну каплю 0,9% водного раствора хлористого натрия. Идентифицируемый образец, содержащий антиген, выращенный в пробирках на скошенном питательном агаре в течение 18-20 ч при температуре 37^оС, снимают с нижней части агара петлей, наносят на предметное стекло вблизи капли 0,9% водного раствора хлористого натрия и эмульгируют (контроль на отсутствие спонтанной агглютинации). При отсутствии спонтанной агглютинации манипуляцию повторяют в капле H-сыворотки, формируя равномерную непрозрачную суспензию.

Учет результатов проводят в течение 2-3 минут, мягко покачивая стекло.

Гомогенная суспензия свидетельствует об отрицательном результате. При наличии агглютининов к исследуемому штамму в капле сыворотки в течение 2-3 мин появляется хлопьевидный агглютинат.

Учет результат РА производят визуально при помощи лупы с увеличением(2х) по четырехкрестной системе

Результаты РА учитываются и оцениваются следующим образом:

++++ – отчетливый агглютинат при полном просветлении жидкости в капле (100%);

+++   – отчетливый аггютинат на фоне мутноватой жидкости (75%);

++     – незначительный агглютинат на фоне мутной жидкости (50%);

+       – следы агглютината, жидкость в капле мутная (25%);

(–)      – отрицательный результат, гомогенно мутная жидкость в капле (0%).

РА с диагностической сывороткой учитывается только при отрицательном результате контроля спонтанной агглютинации.

Идентифицируемый образец, содержащий антиген, относят к соответствующей H-группе, если на стекле получена РА с моновалентной сывороткой этой группы не ниже чем на (+++).

СРОК ГОДНОСТИ

СРОК ГОДНОСТИ

Сальмонеллезная поливалентная H-сыворотка, сухая - 5 лет со дня приемки ОБТК предприятия-изготовителя.

Сальмонеллезная поливалентная H-сыворотка, жидкая - 1 год со дня приемки ОБТК предприятия-изготовителя.