Быстрый тест сифилис

Быстрый тест на сифилис является надежным иммуноферментным абсорбентом на твердой основе для качественного определения антител (IgG, IgM, IgA) против Treponema Pallidum, которые образуются в сыворотке крови человека или плазме. Предназначен для профессионального использования при помощи в диагностике бледной спирохеты. Тест должны быть подтверждены альтернативными методом исследований и клиническими данными.

Быстрый тест на сифилис является композицией двух ключевых компонентов:

1) Основа из микролункамы покрыта рекомбинантным мая антигеном

2) Жидкий коньюгат, что является композицией коньюгованого с лошадиной красной пероксидазой пероксидазой мая антигена (HPR-тр коньюгат).

Во время исследования образец и HPR-тр кон`югат одновременно инкубируется в покрытых микропланшетах. Антитела (IgG, IgM, IgA) и ТР, присутствующие в образце, реагируют по ТР антигеном, которым покрыты лунки, и образуется сэндвич комплекс кон`югат не связанных кон`югат удаляется при вымывании. Образованный из кон`югатом комплекс принимает голубой цвет при дополнительной инкубации с ТМВ субстратом. Реакция прекращается с Стоп Раствором и абсорбат считывают на спектрофотометре при 450 / 620-690 нм.

Сбор и приготовление образцов

· Сыворотка и плазмы должны быть приготовления из цельной крови, взятой с помощью техники венопунктуры.

· Этот набор уже готов для работы с сывороткой и плазмой и не требует дополнительных действий.

· Если образец не нужно исследовать немедленно, нужно заморозить при 2-8ºС. Если ожидается, что исследования будут проведены дольше чем за три дня, образец должен быть заморожен (-20ºС). Удалить конденсат, появившийся при оттаивания. Если образец должен быть транспортирован, запаковать в рекомендованную федеральными регулирующими службами упаковку для транспортировки соответствующим образом.

· Образцы, могут содержать преципитат, что несовместимо с результатами анализа. Такие образцы надо очистить с помощью центрифугирования.

· Не использовать образцы плазмы с большой липемия, очень гемолизированные и мутные. Не использовать образцы, содержащие азид натрия.

процедура анализа

1. Взять необходимое количество лунок в полоске и закройте пить в микропланшетном каркасе. Отложить неиспользованные полоски.

2. Все образцы добавлять в соответствии с отметок в ИФА тестсистемы Рабочей панели

2.1 Пустые лунки. Должны оставаться пустыми. Не добавлять никаких реагентов.

2.2 Контрольные лунки. Добавить 50μL Сифилис Ab положительного, Сифилис Ab отрицательного контроля соответственно в определенные контрольные лунки

2.3 Тестовые лунки. Добавить 50μL соответственно в каждую тестовую лунку.

3. Добавить 50μL HPR-тр кон`югат раствора в каждую лунку, но не в пустые лунки.

4. Нежно стряхнуть лунки 20 секунд для равномерного покрытия лунок.

5. Инкубируют лунки при 37ºС 60 минут.

6. Тщательно удаляют инкубированных смесь в пустой контейнер. Заполняют каждую лунку растворенным моющим буфером и осторожно перемешивают 20-30 секунд. Тщательно удаляют моющий раствор и переносят на планшета с абсорбирующим бумагой. Повторяют процедуру более 4 раз.

7. Вимокують лунки пленкой с чистящей бумагой для удаления избытках ков моющего раствора.

8. Добавляют 50μL (или 1 каплю) ТМВ субстрата А и 50μL (или 1 каплю) ТМВ субстрата В в каждую лунку.

9. Инкубируют при 37ºС в темноте 10 минут.

10. Останавливают реакцию добавляя 50μL (или 1 каплю) стоп буфера в каждую лунку. Осторожно перемешивают в течение 30 секунд. Очень важно добиться того, чтобы голубой цвет полностью изменился на желтый.

11. Исследуют в микропланшетном ридере при длине волны 450 нм измеряя всасывание каждой лунки против пустых лунок в течение 15 минут после добавления Стоп Раствора. Используют фильтр 620-690 нм, как референтную длину волны для оптимизации результата анализа.