Набор реагентов «Сыворотки диагностические сальмонеллезные адсорбированные H-моновалентные для реакции агглютинации» предназначен для качественного выявления, с помощью реакции агглютинации (РА) на предметном стекле, антигенов: a; b; c; d; eh; enz15; enx; f; g; i; h; k; lv; m; gm; p; q; r; st; s; t; u; x; y; w; v; z; z6; z10; z13; z15; z23; z24; z27; z28; z29; z32; z36; z39; z42; z51; 1,2; 1,5; 1,6; 1,7; 2; 5; 6; 7 бактерий рода Salmonella, выделенных из биологического материала человека (моча, испражнения, промывные воды желудка, рвотные массы).

Набор реагентов «Сыворотки диагностические сальмонеллезные адсорбированные H-моновалентные для реакции агглютинации» предназначен для серологической идентификации и подтверждения принадлежности бактерий к роду Salmonella при диагностике заболеваний и выявления сальмонеллоносительства.

В соответствии с серологической классификацией бактерий рода Salmonella моновалентные H-сыворотки содержат H-агглютинины против соответствующих антигенов: a; b; c; d; eh; enz₁₅; enx; f; g; i; h; k; lv; m; gm; p; q; r; st; s; t; u; x; y; w; v; z; z₆; z₁₀; z₁₃; z₁₅; z₂₃; z₂₄; z₂₇; z₂₈; z₂₉; z₃₂; z₃₆; z₃₉; z₄₂; z₅₁; 1,2; 1,5; 1,6; 1,7; 2; 5; 6; 7.

Сальмонеллёз — острая зоонозная инфекционная болезнь с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя, характеризующаяся преимущественным поражением ЖКТ, развитием интоксикации и обезвоживания.

Сальмонеллы — грамотрицательные палочки рода Salmonella семейства Enterobacteriaceae. Выделяют два вида сальмонелл — S. enterica и S. bongori (не патогенный для человека).

В практической работе для серологической идентификации сальмонелл проводят исследование по О, Н- и Vi-антигенам. В соответствии с классификацией Кауфмана-Уайта по О-антигену определяют серологические О-группы сальмонелл, обозначаемые буквами - А, В, С, D и т.д., по Н-антигену идентифицируют серовары возбудителей. К настоящему времени выделены 67 О-групп сальмонелл и более 2,5 тыс сероваров по Н-антигену. В подавляющем большинстве (85-91%) случаев сальмонеллезной инфекции от людей изолируют серовары подвида enterica: S. typhimurium, S. enteritidis, S. раnаmа, S. infantis, S. newport, S. agona, S. derby, S. london и др. Клинические проявления, вызванные различными серотипами сальмонелл, существенно не отличаются друг от друга, поэтому в настоящее время не обозначают в диагнозе "сальмонеллез группы D" или "сальмонеллез С", а указывают лишь клиническую форму болезни и серотип выделенной сальмонеллы, что имеет значение для выявления источника инфекции.

Основным методом для подтверждения наличия сальмонелл является бактериологический (выделение и идентификация возбудителя с помощью питательных сред, биохимических тестов, серологических исследований). Материалом для исследований могут служить испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, а при необходимости моча, кровь, желчь и другие выделения из пораженных органов больных. В особых случаях (вспышки сальмонеллезов) диагноз может быть поставлен на основе клинико-эпидемиологических данных с дополнительными позитивными результатами серологических (РПГА, ИФА, РНГА) и молекулярно-генетических (ПЦР) исследований.

Серологическую идентификацию сальмонелл начинают с испытания их в реакции агглютинации (РА) на стекле с агглютинирующей адсорбированной поливалентной сывороткой к сальмонеллам групп (А, В, С, Д, Е), а в случае получения отрицательного результата с агглютинирующей адсорбированной поливалентной сывороткой к сальмонеллам редких групп. При получении положительных результатов агглютинации со смесью О-поливалентных сывороток, культуру испытывают с каждой О-сывороткой, входящей в смесь. После установления принадлежности культуры к одной из О-групп, выявляют наличие дополнительных О-антигенов, присущих представителям указанной группы. После этого проводят реакцию агглютинации с Н-сыворотками. Начинают с Н-поливалентных сывороток, затем используют Н-пуловые (групповые) и далее Н-моновалентные, по той же схеме, что и с О-сыворотками. При работе с Н-моновалентными сыворотками вначале используют Н-сыворотки, соответствующие Н-антигенам 1 фазы, а потом Н-антигенам 2 фазы, соответствующих более распространенным сероварам данной группы.

Набор выпускается в 50 вариантах комплектации, 2 видов (сухая и жидкая), по 2,0 мл сыворотки во флаконе; 1 флакон одного наименования:

Комплект №1 Сальмонеллезная моновалентная сыворотка, набор

Комплект №1/1 Сальмонеллезная моновалентная сыворотка набор H-a; H-b; H-c; H-d; H-eh; H-enz₁₅; H-enx; H-f; H-g; H-i; H-h; H-k; H-lv; H-m; H-gm; H-p; H-q; H-r; H-st; H-s; H-t; H-u; H-x; H-y; H-w; H-v; H-z; H-z₆; H-z₁₀; H-z₁₃; H-z₁₅; H-z₂₃; H-z₂₄; H-z₂₇; H-z₂₈; H-z₂₉; H-z₃₂; H-z₃₆; H-z₃₉; H-z₄₂; H-z₅₁; H-1,2; H-1,5; H-1,6; H-1,7; H-2; H-5; H-6; H-7 (сухая)

Комплект №1/2 Сальмонеллезная моновалентная сыворотка, набор H-a; H-b; H-c; H-d; H-eh; H-enz₁₅; H-enx; H-f; H-g; H-i; H-h; H-k; H-lv; H-m; H-gm; H-p; H-q; H-r; H-st; H-s; H-t; H-u; H-x; H-y; H-w; H-v; H-z; H-z₆; H-z₁₀; H-z₁₃; H-z₁₅; H-z₂₃; H-z₂₄; H-z₂₇; H-z₂₈; H-z₂₉; H-z₃₂; H-z₃₆; H-z₃₉; H-z₄₂; H-z₅₁; H-1,2; H-1,5; H-1,6; H-1,7; H-2; H-5; H-6; H-7 (жидкая)

Постановка РА на стекле

Перед проведением анализа выдержать все реагенты не менее 30 минут при температуре от 18 до 25 ^оС.

Сухую сыворотку растворяют в 2 мл 0,9% водного раствора хлористого натрия.

На предметное стекло наносят одну каплю (около 40 мкл) сыворотки и одну каплю 0,9% водного раствора хлористого натрия. Идентифицируемый образец, содержащий антиген, выращенный в пробирках на скошенном питательном агаре в течение 18-20 ч при температуре 37^оС, снимают с нижней части агара петлей, наносят на предметное стекло вблизи капли 0,9% водного раствора хлористого натрия и эмульгируют (контроль на отсутствие спонтанной агглютинации). При отсутствии спонтанной агглютинации манипуляцию повторяют в капле H-сыворотки, формируя равномерную непрозрачную суспензию.

Учет результатов проводят в течение 2-3 минут, мягко покачивая стекло.

Гомогенная суспензия свидетельствует об отрицательном результате. При наличии агглютининов к исследуемому штамму в капле сыворотки в течение 2-3 мин появляется хлопьевидный агглютинат.

Учет результат РА производят визуально при помощи лупы с увеличением(2х) по четырехкрестной системе

Результаты РА учитываются и оцениваютс