Анти сыворотка E. coli I поливалентная

Информация для профессионального применения: сыворотки диагностические эшерихиозные предназначены для серологической идентификации штаммов E. сoli из исследуемого материала методом агглютинации на предметном стекле (реакция агглютинации – РА). Серологическая идентификация бактерий E.coli необходима для конечной дифференциации выделенной культуры. Серотипирование является обязательным заключительным этапом лабораторной диагностики эшерихиозов после подтверждения принадлежности выделенных бактерий к роду Escherichia по морфологическим, культуральным и биохимическим признакам.

Состав: поликлональные антитела, полученные путём иммунизации кроликов стандартными штаммами. Для достижения высокой специфичности неспецифические агглютинины были удалены путем абсорбции.

Консервант: 0,1% азид натрия.

Поливалентные:

Анти сыворотка E. coli  I полівалентна (O25:K11, O26:K60, O44:K74, O55:K59, O78:K80, O111:K58, O114:K-, O119:K69)

Анти сывороткаE. coli  II полівалентна (O86:K61,O124:K72,O125:K70,O126:K71,O127:K63,O128:K67)
Анти сывороткаE. coli  III полівалентна (O18a O18c:K77, O20a O20b:K84,O28:K73,O112a O112c:K66)

Моновалентные:

O25 : K11, O126 : K71, O26 : K60, O20 : K67, O18 , O114 : K– ,O112a O112c : K66, O119 : K69, O157, O86 : K61, H7, O124 : K72, O1 : K1, O125 : K70, O2

МЕТОДИКА ИСПОЛЬЗОВАНИЯ:

Негативный контроль: отрицательный контроль проводится в начале серотипирования с целью исключения спонтанной агглютинации. Для этого используют физраствор (0,9% NaCl) вместо сывороток. Небольшое количество исследуемой бактериальной массы следует смешать с каплей физраствора на предметном стекле. Оценить суспензию в течение одной минуты. Если суспензия остается молочно-мутной, или если реакция начинается только после покачивания предметного стекла вперед-назад более 20 раз, результат является отрицательным, что является основанием для проведения реакции агглютинации исследуемой культуры с агглютинующими диагностическими сыворотками.

Слайд-агглютинация живых организмов:

Культуры, подозрительные как патогенные E.coli по морфологическим, культуральным и биохимическим признакам, исследуют в реакции агглютинации на стекле сначала с поливалентными сыворотками Антисыворотка E. coli I поливалентная, Антисыворотка E. coli II поливалентная и Антисыворотка E. coli III

1. Нанесите 1 каплю (около 25 мкл) Антисыворотки E. coli I поливалентны на исследуемый участок чистого предметного стекла.

2. Используя бактериальную петлю, перенесите небольшое количество бактериальной массы на предметное стекло и смешайте с одной каплей диагностической сыворотки до образования гомогенной слегка «молочной» суспензии.

3. Покачивайте предметное стекло вперед-назад в течение одной минуты.

4. Оцените результат:

* Положительный результат реакции слайд-агглютинации: видимая агглютинация (большие или мелкие агглютинины в виде хлопьев) после покачивания пробы вперед-назад менее 20 раз.

* Слабоположительный результат реакции слайд-агглютинации: агглютинация происходит только после покачивания предметного стекла вперед-назад 10-20 раз.

* Отрицательный результат реакции слайд-агглютинации: суспензия остается молочно-мутной, или если реакция начинается только после покачивания предметного стекла вперед-назад более 20 раз.

роведите РА с поливалентными сыворотками Антисыворотка E. coli II поливалентная и Антисыворотка E. coli III поливалентная по описанному выше алгоритму. Оцените результат. Если живые микроорганизмы не дали положительного результат на РА, смешайте 2 петли культуры с 1 мл физраствора, затем прогревайте при 100oC на водяной бане в течение 1 часа. Повторите тест агглютинации, как описано выше. Оцените результат.

При положительной или слабоположительной РА с одной из поливалентных сывороток продолжают серологическую идентификацию культуры с адсорбированными сыворотками, входящими в состав поливалентной, по тому же алгоритму.

Если результат РА положителен с антисывороткой E. coli I поливалентной, тогда следует проводить тестирование с моновалентными сыворотками, входящими в ее состав, а именно:

 O25 : K11

O26 : K60

 O44 : K74

 O55 : K59

 O78 : K80

 O111 : K58

O114 : K-

 O119 : K69

Если результат РА положителен с антисывороткой E. coli II поливалентной, тогда следует проводить тестирование с моновалентными сыворотками, входящими в ее состав, а именно:

O86 : K61

 O124 : K72

 O125 : K70

 O126 : K71

O127 : K63

O128 : K67

Если результат РА положительный с антисывороткой E. coli II поливалентная, тогда следует проводить тестирование с моновалентными сыворотками, входящими в ее состав, а именно:

O18 : K77

O20 : K84

 O28 : K73

 O112 : K66

После определения к какой антигенной группе принадлежит выделенная культура, требуется подтверждение положительного результата посредством агглютинации на предметном стекле с термически убитыми микроорганизмами.