Уреаплазма-флюороген

Диагностикум для выявления антигенов Ureaplasma urealyticum в реакции иммунофлюоресценции

Диагностикум предназначен для выявления в реакции прямой иммунофлюоресценции Ureaplasma urealyticum в препаратах-мазках из клинических материалов, полученных от больных с воспалительными заболеваниями урогенитального тракта.

СОСТАВ НАБОРА

ФИТЦ-антитела к Ureaplasma urealyticum – лиофилизированные кроличьи специфические поликлональные антитела, меченые флюоресцеинизотиоционатом (ФИТЦ), содержащие синьку Эванса и консервант (натрия азид); рыхлая аморфная масса синего цвета.

Раствор для разведения антител (РРА) – фосфатно-солевой буферный раствор, содержащий консервант (натрия азид); прозрачная бесцветная жидкость.

В набор дополнительно входят предметные стекла декорированные с 10 лунками.

ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ

При наличии в исследуемом образце соответствующего возбудителя меченые ФИТЦ антитела специфически соединяются с его антигенами, что выявляется при люминесцентной микроскопии за счет интенсивного зеленого свечения указанных комплексов, контрастирующего с красным цветом эпителиальных клеток, окрашенных синькой Эванса.

 ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Исследованию на присутствие Ureaplasma urealyticum подлежат препараты-мазки, приготовленные из отделяемого слизистой уретры, влагалища, цервикального канала, секретов предстательной железы, эякулятов, осадка клеток из центрифугированных образцов мочи.

Исследуемый материал нанести тонким слоем на поверхность чистого обезжиренного предметного стекла, подсушить на воздухе и фиксировать в этиловом спирте (96 %) в течение 15 минут, после чего вновь подсушить на воздухе. Препарат должен содержать возможно большее количество эпителиальных клеток.

Срок хранения фиксированных препаратов-мазков при 4 ºC - не более трех суток. Более длительное хранение (до 1 мес.) допускается только при минус 70С, повторное замораживание-размораживание препаратов не допускается.

 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ

Диагностическая чувствительность и диагностическая специфичность набора-100 %

Базовый комплект набора рассчитан на исследование 50 образцов, включая контрольные. По желанию потребителя базовая комплектация набора (число индивидуальных упаковок с реагентами и их объемы) может быть изменена.

 СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ

Оборудование и материалы

Камера влажная для инкубации при температуре  37 С.

Микроскоп люминесцентный со светофильтрами ФС 1-2, БС 8-2, СЗС 7-2, ЖС-18.

Масло иммерсионное (нефлюоресцирующее).

Вода водопроводная.

Вода очищенная.

Спирт этиловый ректификованный (96 %).

Подготовка реагентов и материалов

Все компоненты набора выдержать при температуре  от 18 до 25 С не менее 30 мин.

Во флакон с ФИТЦ-антителами внести содержимое флакона с РРА, растворить в течение 3-5 мин при перемешивании.

Раствор антител хранить при температуре  от 2 до 8 С в защищенном от света месте не более 14 сут.

При необходимости более длительного хранения (до 1 мес.) раствор антител разлить на мелкие порции и хранить при температуре  минус 20 С.

Проведение анализа

1. На фиксированный препарат-мазок нанести 30 мкл раствора антител и инкубировать 20 мин во влажной камере при 37 ^оС.

Внимание! Не допускается высыхание препарата с нанесенным раствором антител.

2. Промыть препарат-мазок водопроводной водой в течение 15 мин, сполоснуть дистиллированной водой и высушить на воздухе при комнатной температуре.

Внимание! Тщательная отмывка препарата необходима для устранения неспецифического свечения при микроскопии, источником которого является наличие в исследуемом материале большого количества слизи.

3. Исследовать препарат-мазок под люминесцентным микроскопом с набором светофильтров: ФС 1-2, БС 8-2, СЗС 7-2, ЖС-18 и  при увеличении 600-1000х.

При микроскопии использовать масляную иммерсию или водно-иммерсионную систему.

Внимание! При использовании масляной иммерсии должно применяться только специальное (нефлюоресцирующее) иммерсионное масло.

 Учет результатов

При люминесцентной микроскопии уреаплазмы выявляются в виде интенсивного зеленого гранулярного свечения на мембранах эпителиальных клеток, окрашенных в красноватый цвет, и (или) в межклеточном пространстве.

Результат считают положительным, если во всем препарате выявляют 10 и более ярко-зеленых гранул, четко выделяющихся на красноватом фоне препарата.

При отсутствии специфического (интенсивного зеленого) свечения в препарате результат считают отрицательным.

Если в препарате отсутствуют эпителиальные клетки или обнаружено менее 10 ярко-зеленых гранул, исследование необходимо повторить, обратив особое внимание на правильность забора исследуемого материала.

Желтая или зеленовато-желтая флюоресценция при микроскопии считается артефактом. В этом случае исследование также необходимо повторить.

ФОРМА ВЫПУСКА

Выпускается в наборе:

ФИТЦ-антитела к Ureaplasma urealyticum      0,25 мл – 1 флакон.

РРА                                                                 1,5 мл – 1 флакон.

Предметные стекла                                    – 5 шт.

Каждый комплект с инструкцией по применению упаковывается в картонную коробку.

 СРОК ГОДНОСТИ

Срок годности 18 месяцев. Набор с истекшим сроком годности использованию не подлежит.

ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ

Хранение

В упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 ^оС. Замораживание не допускается.

Транспортирование

При температуре от 2 до 8 ^оС. Замораживание не допускается. Допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 ^оС в течение 10 сут.