ОСНОВА ОКСФОРДСЬКОГО АГАРУ ДЛЯ ЛІСТЕРІЙ

Рекомендують для виділення видів Listeria з патологічного матеріалу

Склад г/л

Пептон спеціальний 23,00

Літіюхлорид 15,00

Натрія хлорид 15,00

Крохмалькукурудзяний 1,00

Агар-агар 10,00

Залізаамонійного цитрат 0,50

Ескулін 1,00

Зовнішній вигляд:

Флакон з 500 гсухого середовища.

Спосіб приготування:

27,75 г сухого середовищаразмішатиу1000 мл дистильованої води. Сумішкип’ятити до повного

розчиненняінгредієнтів. ,перевірити рН і, при необхідності, скориктуватизначеннядо 7,0±0,2,

використовуючи 10% розчинNaOHабо 10% розчинHCl. Стерелізувати в автоклаві при 121°C протягом

15 хвилин.Остудити до 500С і асептичнододатирозчинений в 50% -му етанолівміст флакона з

селективноїдобавкою для виділеннялістерій.

Густина готового середовища:

Утворюється средовище, що відповідає за густиною 1,0%-ному агаровому гелю.

Колірта прозорість готового средовища:

Готове средовищемає темно-бурштиновий окрас, незначний преципітат,злегка опалесцує.

Кислотність средовища:

При 25°Сводний розчин (5,55 % вага/об)рН 7,0 ± 0,2.

Принцип та оцінка результата:

 Використовують для виділення Listeriamonocytogenes з клінічних зразків і зразків

харчових продуктів.

 Хлорид літію та антибіотики пригнічують ріст грамнегативної мікрофлори і переважної

частини грампозитивної флори Listeriamonocytogenesгідролізуєескулін на ескулетин і

глюкозу. Реагуючи з цитратом заліза, ескулетин утворює коричнево-чорний комплекс,

що призводить до потемніння середовища навколо колоній.

 Методика виділення лістерій залежить від виду досліджуваного матеріалу . Для всіх

зразків рекомендується селективне і холодове збагачення . Фекалії та інші біоматеріали

гомогенізують в 0,1% пептонній воді і 0,1 мл отриманої суспензії висівають на

Оксфордський агар ,або в бульйон для селективного збагачення лістерій, інкубують при

30С протягом 7 днів, після чого висівають на селективне середовище.

 Після інокуляції середовища досліджуваним зразком його розташовують в інкубаторі

на 24-48годин при температурі 35-37°C.

Результати:

Штами мікроорганізмів (ATCC) Ріст Гідроліз ескуліну

Listeriamonocytogenes (19117) рясний +

Listeriamonocytogenes (19111) рясний +

Listeriamonocytogenes (19111) рясний +

Staphylococcusaureus (25923) гарний –

Enterococcusfaecalis (29212) інгібування –

Enterococcushirae (10541) інгібування –

Bacillussubtilis (6633) інгібування –

центром

Salmonellatyphi (6539) рясний червоні з чорним

центром

Salmonellatyphimurium (14028) рясний червоні з чорним

центром

Shigellasonnei (25931) рясний червоні

Shigella dysenteriae (13313) рясний червоні