Живильне середовище для визначення токсигенності дифтерійних мікробів сухе (Корінетоксагар) 

1. ПРИЗНАЧЕННЯ

«Корінетоксагар» призначений для визначення токсигенності дифтерійних мікробів при діагностиці інфекційних захворювань «in vitro».

2. ХАРАКТЕРІСТРІКА НАБОРУ

«Корінетоксагар» являє собою суміш сухих компонентів у вигляді мелкодісперс-ного гігроскопічного порошку світло-жовтого кольору.

Випускається в поліетиленових банках по 250 г.

2.1. ПРИНЦИП ДІЇ

Сукупність компонентів, що входять до складу набору, забезпечує поживні потреби для росту всіх видів коринебактерій і продукування токсину токсигенними штамами.

В основі методу визначення токсигенності коринебактерій дифтерії лежить процес зустрічній иммунодиффузии токсину і антитоксичних антитіл в щільному живильному середовищі. У місцях оптимального кількісного співвідношення між токсин, який виробляється кору-небактеріямі і антитоксином, нанесеним на фільтрувальну папір, відбувається їх взаємодія з утворенням преципітату у вигляді білої лінії або «вусів».

2.2. СКЛАД НАБОРУ

«Корінетоксагар» являє собою суміш сухих компонентів з розрахунку, г / л:

Панкреатичний гідролізат минтая .................. 20,0

Натрію хлорид …….............................................. . ... ... 5,0

Натрію карбонат ................................................ ....... ... .. 0,6-0,1

Агар мікробіологічний .............................. .. 10,0 ± 3,0

3. АНАЛІТИЧНІ І ДІАГНОСТИЧНІ ХАРАКТЕРИСТИКИ

 «Корінетоксагар» забезпечує на всіх засіяних чашках Петрі зростання всіх типів кору-небактерій і освіту токсину токсигенними тест-штамами Corynebacterium diphtheriae gravis 665, Corynebacterium diphtheriae mitis 6765 і Corynebacterium diphtheriae intermedius 619, що виявляється в утворенні ліній преципітації через 22-24 год інкубації при температурі (37±1) ° с при перегляді посівів з лупою в світлі, на темному тлі. Через 44-48 год інкубації при температурі (371) ° С лінії преципітації стають компактніше і повинні бути видні неозброєним оком.

Зростання нетоксигенних штамів Corynebacterium diphtheriae gravis nontoxigenic 4895, Corynebacterium diphtheriae mitis nontoxigenic 3689 і Corynebacterium diphtheriae intermedius nontoxigenic 7227 на всіх засіяних чашках не супроводжується утворенням ліній преціпі-тації.

4. ЗАСТЕРЕЖЕННЯ

Дотримання «Правил будови, техніки безпеки, виробничої санітарії, протиепідемічного режиму і особистої гігієни при роботі в лабораторіях (відділеннях, відділах) санітарно-епідеміологічних установ системи Міністерства охорони-охорони» (Москва, 1981 г.).

5. ОБЛАДНАННЯ І МАТЕРІАЛИ

• Термостат забезпечує температуру 37 ± 1 ° С

• Ваги лабораторні 2 класу точності

• Автоклав

• Пробірки скляні місткістю - 10 мл

• Прилади й піпетки скляні дозволяють відбирати об'єми рідини 1 і 2 мл

• Циліндр скляний мірний місткістю 1000 мл

• Чашки Петрі стерильні

• Вода дистильована

• Колби

• Воронки скляні

6. аналізованому зразку

Об'єкти досліджень в санітарної та клінічної мікробіології.

7. ПІДГОТОВКА ДО АНАЛІЗУ

Приготування «Корінетоксагара».

Препарат у кількості, зазначеній на етикетці для приготування конкретної серії пі-тательной середовища, розмішують в 1 л дистильованої води, кип'ятять 3 хв до повного рас-плавлення агару. Середовище розливають в стерильні флакони розмірено, стерилізують автоклавірова-ням при температурі 110 ° С протягом 30 хв. Після автоклавування і охолодження до 45-50 ºС додають 20% сироватки крові великої рогатої худоби або сироватки кінської нормальної, перемішують і розливають у стерильні чашки Петрі.

Готове середовище в чашках Петрі прозора, жовтого кольору.

До внесення сироватки середу можна використовувати протягом 14 діб при температурі зберігання 2-8 ° С. Середу з сироваткою можна використовувати протягом 5 діб при температурі зберігання 2-8 ° С.

Приготування паперових смужок.

Смужки фільтрувального паперу розміром 80х15 мм завертають в паперові пакетики по 3 штуки і стерилізують в автоклаві при температурі 120 ° С протягом 30 хв. Паперові смужки стерильним пінцетом поміщають в стерильну чашку Петрі і змочують дифтерійним антитоксином, попередньо розчиненим у 1 мл стерильної дистильованої води або стерильного 0,9% розчину натрію хлориду (на змочування однієї паперової смужки йде 0,25 мл розчину дифтерійного антитоксину). Змочену папірець стерильним пінцетом переносять на поверхню живильного середовища в чашку Петрі. Чашки підсушують у відкритому вигляді догори дном в термостаті при температурі (37±1) ° С протягом 15-20 хв.