Уреаплазма-флюороген

Діагностикум для виявлення антигенів Ureaplasma urealyticum в реакції іммунофлюорісценціі

ПРИЗНАЧЕННЯ

Діагностикум призначений для виявлення в реакції прямої імунофлюоресценції антигенів Ureaplasma urealyticum у препаратах-мазках з клінічних матеріалів, отриманих від хворих з запальними захворюваннями урогенітального тракту.

 СКЛАД НАБОРУ

 ФІТЦ-антитіла до Ureaplasma urealyticum - ліофілізовані кролячі специфічні поліклональні антитіла до цитоплазматичних мембран Ureaplasma urealyticum, мічені флюоресцеінізотіоціонатом (ФІТЦ), що містять синьку Еванса і консервант (натрію азид); пухка аморфна маса синього кольору.

Розчин для розведення антитіл (РРА) - фосфатно-сольовий буферний розчин, що містить консервант (натрію азид); прозора безбарвна рідина.

У набір додатково входять предметні скельця декоровані з 10 лунками.

 ПРИНЦИП ДІЇ

При наявності в досліджуваному зразку відповідного збудника мічені ФІТЦ антитіла специфічно з'єднуються з його антигенами, що виявляється при люмінесцентнії мікроскопії за рахунок інтенсивного зеленого світіння зазначених комплексів, що контрастує з червоним кольором епітеліальних клітин, забарвлених синькою Еванса.

 ДОСЛІДЖУВАНІ ЗРАЗКИ

Дослідженню на присутність Ureaplasma urealyticum підлягають препарати-мазки, приготовлені з виділень слизової уретри, піхви, цервікального каналу, секретів передміхурової залози, еякулятів, осаду клітин з центрифугованих зразків сечі.

Досліджуваний матеріал нанести тонким шаром на поверхню чистого знежиреного предметного скла, підсушити на повітрі і фіксувати в етиловому спирті (96%) протягом 15 хвилин, після чого знову підсушити на повітрі. Препарат повинен містити якомога більшу кількість епітеліальних клітин.

Термін зберігання фіксованих препаратів-мазків при 4 ºC - не більше трьох діб. Більш тривале зберігання (до 1 міс.) Допускається тільки при мінус 70 ºC, повторне заморожування-розморожування препаратів не допускається.

 АНАЛІТИЧНІ І ДІАГНОСТИЧНІ ХАРАКТЕРИСТИКИ

 Діагностична чутливість і діагностична специфічність набору - 100%

Базовий комплект набору розрахований на дослідження 50 зразків, включаючи контрольні. За бажанням споживача базова комплектація набору (число індивідуальних упаковок з реагентами і їх обсяги) може бути змінена.

 СПОСІБ ЗАСТОСУВАННЯ

 Устаткування і матеріали

 Камера волога для інкубації при температурі 37 ° С.

Мікроскоп люмінесцентний з світлофільтрами ФС 1-2, БС 8-2, СЗС 7-2, ЖС-18.

Масло іммерсійне (нефлюоресціруюче).

Вода водопровідна.

Вода очищена.

Спирт етиловий ректифікований (96%).

 Підготовка реагентів і матеріалів

 Всі компоненти набору витримати при температурі від 18 до 25 ° С не менше 30 хв.

У флакон з ФІТЦ-антитілами внести вміст флакона з РРА, розчинити протягом 3-5 хв при перемішуванні.

Розчин антитіл зберігати при температурі від 2 до 8 ° С в захищеному від світла місці не більше 14 діб.

При необхідності більш тривалого зберігання (до 1 міс.) Розчин антитіл розлити на дрібні порції і зберігати при температурі мінус 20 ° С.

 Проведення аналізу

1. На фіксований препарат-мазок нанести 30 мкл розчину антитіл і інкубувати 20 хв у вологій камері при 37 ° С.

Увага! Не допускається висихання препарату з нанесеним розчином антитіл.

2. Промити препарат-мазок водопровідною водою протягом 15 хв, сполоснути дистильованою водою і висушити на повітрі при кімнатній температурі.

Увага! Ретельне відмивання препарату необхідна для усунення неспецифічного світіння при мікроскопії, джерелом якого є наявність в досліджуваному матеріалі великої кількості слизу.

3. Дослідити препарат-мазок під люмінесцентним мікроскопом з набором світлофільтрів: ФС 1-2, БС 8-2, СЗС 7-2, ЖС-18 і при збільшенні 600-1000х.

При мікроскопії використовувати масляну іммерсію або водно-іммерсійну систему.

Увага! При використанні масляної імерсії має застосовуватися тільки спеціальне (нефлюоресціруюче) іммерсійне масло.

 Облік результатів

При люмінесцентній мікроскопії уреаплазми виявляються у вигляді інтенсивного зеленого гранулярного світіння на мембранах епітеліальних клітин, забарвлених в червоний колір, і (або) в міжклітинному просторі.

Результат вважають позитивним, якщо в усьому препараті виявляють 10 і більше яскраво-зелених гранул, чітко виділяються на червоному тлі препарату.

При відсутності специфічного (інтенсивного зеленого) світіння в препараті результат вважають негативним.

Якщо в препараті відсутні епітеліальні клітини або виявлено менше 10 яскраво-зелених гранул, дослідження необхідно повторити, звернувши особливу увагу на правильність забору досліджуваного матеріалу.

Жовта або зеленувато-жовта флюоресценція при мікроскопії вважається артефактом. У цьому випадку дослідження також необхідно повторити.

 ФОРМА ВИПУСКУ

Випускається в наборі:

ФІТЦ-антитіла до Ureaplasma urealyticum 0,25 мл - 1 флакон.

РРА 1,5 мл - 1 флакон.

Предметні скельця - 5 шт.

Кожен комплект з інструкцією із застосування упаковується в картонну коробку.

 ТЕРМІН ПРИДАТНОСТІ

 Термін придатності 18 місяців. Набір з вичерпаним терміном придатності використанню не підлягає.

 ЗБЕРІГАННЯ І ТРАНСПОРТУВАННЯ

Зберігання

В упаковці підприємства-виробника при температурі від 2 до 8 °С. Заморожування не допускається.

Зберігання після розтину компонентів набора- протягом всього терміну при температурі від 2 до 8 °С.

Транспортування

При температурі від 2 до 8 ° С. Заморожування не допускається. Допускається транспортування при температурі від 9 до 25 ° С протягом 10 діб.