Сыворотки диагностические эшерихиозные О-групповые и факторные адсорбированные для реакции агглютинации-представляют собой жидкие или лиофилизированные иммунные сыворотки, полученные из крови кроликов, гипериммунизированных О-антигенами Escherichia coli:

групповые:

О1, О2, О4, О5, О6, О7, О8, О9, О11, О18abc, О20, О22, О25, О26, О28, О32, О33, О44, О55, О75, О85, О86, О111, О112abc, О114, О119, О124, О125abc, О126, О127, О128, О142, О143, О144, О157, О164.

факторные:

О18b, О18с, О112b, О112с, О125b, О125с.

Сыворотки (иммуноглобулины) представляют собой прозрачные бесцветные или розово-желтого цвета жидкости или гигроскопическую пористую аморфную массу белого или розовато-желтого цвета.

Назначение: Серологическая идентификация E.Coli по О и К антигенам в реакции агглютинации (РА) на стекле.

Аналитические и диагностические характеристики

Специфическая активность: сыворотки и иммуноглобулины должны давать положительную реакцию РА с гомологичными тест-штаммами E.coli и давать отрицательную реакцию с гетерологичными тест-штаммами E.coli.

Специфическая активность набора при определении на музейных тест штаммах E.coli -100%.

Диагностическая специфичность набора определяется на музейных тест-штаммах E.coli как процентное содержание образцов, определенных набором как отрицательные, и составляет более 97%.

Диагностическая чувствительность набора определяется на музейных тест-штаммах E.coli как процентное содержание образцов, определенных набором как положительные, и составляет более 99%.

Способ применения:

Идентификация исследуемой культуры начинается с постановки РА на стекле с поливалентными сыворотками ОК-сыворотками.

При положительной РА с одной из поливалентных сывороток живую культуру далее проверяют в РА на стекле с ОК- иммуноглобулинами или с типовыми ОК-сыворотками (в разведении 1:5) тех ОК-групп, антитела к которым содержит поливалентная сыворотка.

Положительную РА с иммуноглобулинами подтверждают с соответствующими адсорбированными О-групповыми сыворотками в РА на стекле с культурой, прогретой при 100 С в течение 30 минут и отцентрифугированной в течении 15 минут при 2500-3500 об/мин.

При отсутствии ОК-иммуноглобулинов определение ОК-групп E.coli проводят с помощью ОК-сывороток в РА на стекле с живой культурой, а затем в пробирочной при 100С в течение 30 минут.

Постановка РА на стекле

Групповые и факторные О-сыворотки

Идентифицированного культуру, выращенную в пробирках на скошенном мясопептонного агаре в течение 18-20 ч при температуре 37 ° С, смывают 0,9% раствором хлористого натрия, устанавливают концентрацию микробной взвеси, соответствующую 10 единицам по отраслевому стандарту мутности (ОСО 42- 28-85-08П). Полученную стандартизированную суспензию прогревают 30 мин на водяной бане при 100 ° С. прогретую микробную суспензию центрифугируют 15 мин при 2500-3500 об / мин, надосадочную жид-кость удаляют. Осадок используют для постановки РА.

Сухую сыворотку растворяют в 1 мл 0,9% водного раствора хлористого натрия. Каплю раствора (около 50 мкл) наносят на предметное стекло.

0,01 мл осадка прогретой микробной взвеси пипеткой наносят на предметное стекло рядом с каплей сыворотки и постепенно, начиная с края капли растирают в ней.

При наличии аглютининов к исследуемому штамма в капле сыворотки в течение 3 мин появляется мелкозернистый аглютинат.

Контролем служит полученная аналогичным способом суспензия исследуемой культуры в 0,9% растворе натрия хлористого.

Учет и интерпретация результатов

Результаты РА учитываются визуально и оцениваются следующим образом:

4 (+) - мелкозернистый хорошо выраженный аглютинат, полностью прозрачная жидкость в капли.

3 (+) - мелкозернистый хорошо выраженный аглютинат, жидкость в капли в полном объеме прозрачная.

2 (+) - аглютинат слабо выражен, жидкость в капли мутная.

1 (+) - следы аглютинат, жидкость в капли мутная.

(-) - отрицательный результат, гомогенно мутная жидкость в капли.

РА с диагностической сывороткой учитывается только при ее отсутствии в контроле.

Исследуемую культуру относят к соответствующей О-группе, если на стекле получена РА с сывороткой этой группы не ниже чем на 3 (+).

Адсорбированные факторные О-сыворотки используют при положительной РА с соответствующей групповой адсорбированной сывороткой при необходимости определения парциального строения О-антигена выделенной культуры

Форма выпуска

Базовый вариант комплектации включает по 1 флакону (1 мл) каждой сыворотки (иммуноглобулина) из числа поименованных в комплекте: флаконы помещены вместе с инструкцией по применению соответствующего комплекта в картонную коробку. По желанию потребителя базовая комплектация может быть изменена.

Срок годности

Срок годности каждой серии сывороток (иммуноглобулинов): сухих - 5 лет и жидких 2 года со дня приемки ОБТК предприятия-изготовителя

Хранение и транспортирование

Хранить в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 С

Транспортирование при температуре от 9-25 С сухих сывороток (иммуноглобулинов) в течении 14 суток, жидких - в течение 10 суток.