Сироватки діагностичні ешеріхіозні О-групові і факторні адсорбовані для реакції аглютинації- являють собою рідкі або ліофілізовані імунні сироватки, отримані з крові кроликів, гіперімунізованих О-антигенами Escherichia coli:

групові:

О1, О2, О4, О5, О6, О7, О8, О9, О11, О18abc, О20, О22, О25, О26, О28, О32, О33, О44, О55, О75, О85, О86, О111, О112abc, О114, О119, О124, О125abc, О126, О127, О128, О142, О143, О144, О157, О164.

факторні:

О18b, О18с, О112b, О112с, О125b, О125с.

Сироватки (імуноглобуліни) представляють собою прозорі безбарвні або рожево-жовтого кольору рідини або гігроскопічну пористу аморфну ​​масу білого або рожево-жовтого кольору.

Призначення: Серологічна ідентифікація E.Coli по О і К антигенів в реакції аглютинації (РА) на склі.

Аналітичні і діагностичні характеристики

Специфічна активність: сироватки та імуноглобуліни повинні давати позитивну реакцію РА з гомологічними тест-штамами E.coli і давати негативну реакцію з гетерологічними тест-штамами E.coli.

Специфічна активність набору при визначенні на музейних тест штамах E.coli -100%.

Діагностична специфічність набору визначається на музейних тест-штами E.coli як процентний вміст зразків, визначених набором як негативні, і становить понад 97%.

Діагностична чутливість набору визначається на музейних тест-штами E.coli як процентний вміст зразків, визначених набором як позитивні, і становить понад 99%.

Спосіб застосування:

Ідентифікація досліджуваної культури починається з постановки РА на склі з полівалентними сироватками ОК-сироватками.

При позитивній РА з однією з полівалентних сироваток живу культуру далі перевіряють в РА на склі з ОК імуноглобулінами або з типовими ОК-сироватками (в розведенні 1: 5) тих ОК-груп, антитіла до яких містить полівалентна сироватка.

Позитивну РА з імуноглобулінами підтверджують з відповідними адсорбованими О-груповими сироватками в РА на склі з культурою, прогрітій при 100 ° С протягом 30 хвилин і відцентрифуговувати протягом 15 хвилин при 2500-3500 об / хв.

При відсутності ОК-імуноглобулінів визначення ОК-груп E.coli проводять за допомогою ОК-сироваток в РА на склі з живою культурою, а потім в пробіркових при 100С протягом 30 хвилин.

Групові та факторні О-сироватки

Ідентифіковану культуру, вирощену в пробірках на скошеному м'ясо-пептонном агарі протягом 18-20 год при температурі 37 °С, змивають 0,9% розчином хлористого натрію, встановлюють концентрацію мікробної суспензії, відповідну 10 одиницям за галузевим стандартом мутності (ВЗГ 42-28- 85-08П). Отриману стандартизовану суспензію прогрівають 30 хв на водяній бані при 100 °С. прогріту мікробну суспензію центрифугують 15 хв при 2500-3500 об / хв, надосадову жид-кістка видаляють. Осад використовують для постановки РА.

Суху сироватку розчиняють в 1 мл 0,9% водного розчину хлористого натрію. Краплю розчину (близько 50 мкл) наносять на предметне скло.

0,01 мл осаду прогрітої мікробної суспензії піпеткою наносять на предметне скло поруч з краплею сироватки і поступово, починаючи з краю краплі розтирають в ній.

При наявності аглютинінов до досліджуваного штаму в краплі сироватки протягом 3 хв з'являється дрібнозернистий аглютинат.

Контролем служить отримана аналогічним способом суспензія досліджуваної культури в 0,9% розчині натрію хлористого.

Облік та інтерпретація результатів

Результати РА враховуються візуально і оцінюються наступним чином:

4 (+) - дрібнозернистий добре виражений аглютинат, повністю прозора рідина в краплі.

3 (+) - дрібнозернистий добре виражений аглютинат, рідина в краплі в повному обсязі прозора.

2 (+) - аглютинат слабо виражений, рідина в краплі каламутна.

1 (+) - сліди аглютинат, рідина в краплі каламутна.

(-) - негативний результат, гомогенно каламутна рідина в краплі.

РА з діагностичною сироваткою враховується тільки при її відсутності в контролі.

Досліджувану культуру відносять до відповідної О-групі, якщо на склі отримана РА з сироваткою цієї групи не нижче ніж на 3 (+).

Адсорбовані факторні О-сироватки використовують при позитивній РА з відповідною груповий адсорбированной сироваткою при необхідності визначення парціального будови О-антигену виділеної культури

Термін придатності

Термін придатності кожної серії сироваток (імуноглобулінів): сухих - 5 років і рідких 2 роки з дати приймання ОБТК підприємства-виготовлювача

Зберігання та транспортування

Зберігати в упаковці підприємства-виготовлювача при температурі від 2 до 8 С

Транспортування при температурі від 9-25 С сухих сироваток (імуноглобулінів) протягом 14 діб, рідких - протягом 10 діб.

Термін поставки: 5 днів

Інформація актуальна: 07.07.2019