RPR-Carbon-DAC

ТЕСТ НА СИФИЛИС.  АГГЛЮТИНАЦИЯ. 

RPR-CARBON–КАРДИОЛИПИНОВЫЙ АНТИГЕН.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Метод основан на реакции преципитации между стабилизированной суспензией угольных частиц, обработанных липидным комплексом, и рядом антител, присутствующих  в сыворотке или плазме больных сифилисом, которые в результате агглютинации образуют комплекс «антиген-антитело» в виде преципитата (сгустка)  наблюдаемого макроскопически.

Тест используется в 2-х вариантах: для быстрого выявления сифилиса (качественный тест) и для определения его содержания (полуколичественный тест).

ОБРАЗЦЫ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ

Сыворотка или плазма. Не использовать гемолизированные и липемические сыворотки.

Стабильны  при 2-8⁰С до 7 дней, при минус 20^оС – 3 месяца.

ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

Дозатор 10 - 50 µl. Ротатор, частота до 100 об/мин.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Контрольные сыворотки, поставляемые в наборе, протестированы на наличие антител к HIV,HCV и HBs-антигену и признаны отрицательными.

Возможные остатки реагентов и образцы сыворотки пациентов подлежат уничтожению в соответствии с утвержденными внутрибольничными правилами.

ХОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Доведите все реагенты до 18-22⁰С (комнатная температура), аккуратно взболтайте флакон с RPR-Reagent до получения однородной суспензии и обезжирьте рабочую поверхность слайда.

Качественный тест (скрининг)

Микровариант:

1. Поместите 25 ml образца и по 25 µl RPR-Positive Control и RPR-Negative Control в отдельные круги на слайде. (Примечание 1).

2. Добавьте 10 µl RPR-Reagent в каждый круг, не касаясь образца и контролей.

3. Палочкой тщательно смешайте реагенты. Для каждой пробы используйте новую палочку.

4. Равномерными круговыми движениями вращайте слайд в течение 8 минут так, чтобы смесь медленно вращалась внутри круга.

5. По истечении 8 минут произведите оценку результата реакции при ярком искусственном освещении.

Для стандартизации процедуры вращения рекомендуется использовать ротатор (80-100 об/мин).   

При необходимости объем реагентов и образцов можно пропорционально увеличить до 20-50 μl.

Макровариант:

1. Поместите 50 ml образца в круг на слайде.

2. Добавьте 20 µl RPR-Reagent в каждый круг, не касаясь образца и контролей.

Далее действуйте аналогично микроварианту.

Для более удобного дозирования реагента используйте капельницу флакона с RPR-Reagent, в этом варианте объем образца (контроля) необходимо увеличить до 125 ml.

Полуколичественный тест

(определение титра)

Приготовьте разведения исследуемой сыворотки в физиологическом растворе 9 g/l. Далее действуйте  аналогично качественному тесту.

ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ

Исследуйте визуально присутствие или отсутствие сгустков в кругах, в течение минуты после извлечения слайда из ротатора. Результаты отмечаются и регистрируются по следующим критериям:

Положительная сыворотка может быть оттитрована. Для титрования приготовьте серийные двойные разведения с физиологическим раствором. Титр сыворотки определяется как наибольшее разведение, дающее положительный результат.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Рекомендуется регулярно проводить контроль RPR-Reagent положительной и отрицательной контрольными сыворотками.

ХАРАКТЕРИСТИКИ ПРОЦЕДУРЫ

- Эффект прозоны не наблюдается до титра ≥ 1/128.

-Чувствительность: 86 % (первичный сифилис) и 100 % (вторичный сифилис).

- Специфичность: 98 %.

Интерференция:

Гемоглобин  до 10 g/l, билирубин до 20 mg/dl и липиды до 10 g/l не влияют на результат определения. Некоторые лекарственные препараты и субстанции могут влиять на результат определения⁴.

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ И ОГРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА

Сифилис - заболевание, передающееся половым путем, вызванное бледной трепонемой (Treponema Pallidum), протекающее с периодическими ремиссиями и обострениями, а также образованием очагов воспаления в тканях и органах.

Заражение бледной трепонемой может приводить:

- к осложненным баланитам, баланопоститам, фимозам у мужчин в первичном периоде;

- во вторичном периоде возможно сифилитическое облысение, а также поражение костей, надкостницы и суставов;

- третичный период характеризуется необратимыми поражениями внутренних органов и тканей.

Кардиолипинподобные тесты неспецифичны для сифилиса. Все реактивные образцы должны подвергаться дополнительным серологическим тестам (EIA, TPHA), для подтверждения результатов.

Ложноположительные реакции могут выявляться при инфекционном мононуклеозе, пневмонии, токсоплазмозе, беременности и аутоиммунных заболеваниях.

Тест особенно полезен для определения эффективности антибиотикотерапии.

Срок поставки: 5 дней

Информация актуальна: 30.09.2018