Основа агару для ідентифікації лістерій (PALCAM) (DM932)

Призначення:

Основа агару для ідентифікації лістерій (PALCAM) (DM932)рекомендують для селективного виділення і ідентифікації лістерій.

Короткий опис та пояснення:

Рід Listeria включає Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Listeria seeligeri, Listeria welshimerii, Listeria innocua, Listeria grayi, Listeria murrayi і Listeria denitrificans. Серед них Listeria monocytogenes і Listeria ivanovii пов'язані із захворюваннями у людей. Патогенність Listeria ivanovii невизначено. Listeria monocytogenes знаходять в широкому діапазоні місць існування, в тому числі нормальній мікрофлорі здорових жуйних, шлунково-кишковому тракті асимптоматичних людей і екологічних джерелах, включаючи річкову воду, стічні води, ґрунт, силос, добрива і рослинність, що розкладається.(1)

Агар для ідентифікації лістерій, відомий також як Поліміксин-Акрифлавін-Літій-Хлорид-Цефтазидим-Ескулін-Маніт (PALCAM), був сформульований Van Netten та ін.(2) і рекомендується для виділення Listeria monocytogenes зі зразків продуктів харчування. PALCAM середовище широко рекомендується для використання у виявленні L.monocytogenes у харчових продуктах, (3-8) молоці і молочних продуктах,(9) і пробах з довкілля.(5) PALCAM середовище має високу вибірковість у зв'язку з наявністю літію хлориду, цефтазидиму, поліміксину і гідрохлориду акрифлавіну. PALCAM середовище є диференційно-діагностичним з використанням таких двох систем показників, як ескулін і цитрат заліза та маніт і феноловий червоний.

Принцип дії:

Основа агару для ідентифікації лістерій містить пептичний перевар тваринної тканини, що слугує основним джерелом поживних речовини для мікроорганізмів. Глюкоза, крохмаль і маніт є вуглеводнями і енергетичними джерелами. Хлористий натрій підтримує осмотичну рівновагу середовища. Феноловий червоний - індикатор рН, який демонструє зміни в рН середовища.

Селективність середовища досягається за рахунок присутності хлориду літію, сульфату поліміксину B і акрифлавіну гідрохлориду, та цефтазидиму, передбаченого PALCAM антимікробною добавкою. Ці агенти ефективно пригнічують ріст найбільш часто зустрічаючихся бактерій, окрім лістерій, присутніх у харчових продуктах. Диференціація на PALCAM середовищі заснована на гідролізі ескуліну і ферментації маніту. Всі лістерії гідролізують ескулін, про що свідчить почорніння середовища. Це почорніння є результатом формування 6,7-дігідроксікумаріну, який реагує з іонами тривалентного заліза, що присутні в середовищі у вигляді тривалентного заліза амонійного цитрату. У деяких випадках на цьому середовищі  крім Listeria, можуть рости інші організми, такі як стафілококи або ентерококи. Маніт і індикатор рН, феноловий червоний, додаються для розпізнавання манітферментуючих штамів Listeria. Ферментація маніту позначається зміною кольору колонії і / або навколишнього середовища з червоного або сірого до жовтого через виробництво кислих кінцевих продуктів.

Яєчний жовток (2,5% об / об) в PALCAM агар додають, щоб допомогти відновленню пошкоджених клітин. Додавання крові в PALCAM агар дозволяє диференціювати і підрахувати гемолітичні види Listeria.

Формула \ Літр

Приготування:

1.   Розмішати 34,44 г сухого середовища у 1000 мл дистильованої води.

2.   Нагріти якщо необхідно до повного розчинення частинок.

3.   Стерилізувати автоклавуванням при 1,1 ат (121°С) протягом 15 хвилин.

4.   Охолодити до 50^оС і асептично додати регідратований вміст 1 флакону селективної добавки для лістерій (PALCAM) (MS070).