Индикаторные бумажные системы (СИБ) для идентификации микроорганизмов представляют собой диски диаметром 6 мм из хроматографической бумаги, содержащие определенные количества реагентов.
АНАЛИЗИРОВАННЫЕ ОБРАЗЦЫ
Исследование проводить с чистой культурой, после определения принадлежности к роду Corynebacterium (рассеяние на пластинчатые среды, микроскопия мазка, окрашенного по Леффлеру).
Для работы использовать культуры, выращенные от 18 до 24 ч при температуре 37°С на поверхности коринебакагара или слабощелочного питательного агара, содержащего 10% лошадиной сыворотки или сыворотки крупного рогатого скота или 5% гемолизованной крови.
СПОСОБ ПРИМЕНЕНИЯ
1. Чашку Петри со средой для определения токсигенности дифтерийных микробов подсушить при температуре 37°С от 15 до 20 мин, повернув вверх дном чашку и крышку.
2. По истечении указанного времени на поверхность агара стерильным пинцетом поместить индикаторные бумажные диски с дифтерийным антитоксином. Вокруг каждого диска с антитоксином сформировать бактериологическую петлю диаметром 2 мм 5 «бляшек» из суточной агаровой культуры: чередуя 2 «бляшки» контрольного токсигенного штамма и 3 «бляшки» опытные (из одного анализа с подозрительными колониями сформировать минимум 2 «бляшки» и бляшку» из смеси от 3 до 6 однотипных колоний; Все 5 "бляшек" следует разместить симметрично вокруг диска на расстоянии 0,6 или 0,7 см от края. Диаметр каждой «бляшки» – 0,7 см. На одной чашке Петри можно разместить до 4 дисков с антитоксином и, соответственно, до 20 «бляшек» с культурами.
3. Чашки с посевами (вверх по дну) поместить в термостат и инкубировать от 24 до 48 часов при температуре 37°С.
4. Учет токсигенности следует проводить через 18-24 ч и окончательно через 48 ч инкубации при температуре 37°С.
5. Опытные культуры считаются токсигенными, если образующиеся линии преципитации сливаются под углом с линиями преципитации контрольного токсигенного штамма.
Отсутствие линий преципитации у опытных культур через 48 ч при наличии их у контрольного токсигенного штамма указывает на отсутствие токсигенности у изучаемых культур.
ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8 С в защищенном от света месте после каждого использования. Срок годности 1 год.
