Системы индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов.
Набор №1 для идентификации вибрионов
Выпускают в
наборе из 13 тестов: 11 флаконов с СИБ-дисками, и 2 пробирки с СИБ-полосками.
Состав
Системы
индикаторные бумажные (СИБ) дня идентификации микроорганизмов (набор
диагностический) представляют собой диски или полоски хроматографической
бумаги, содержащие определенные количества субстрата в сочетании с
индикатором, стабилизированные пленкообразующим покрытием - поливиниловым спиртом.
СИБ выпускают в наборе из 13 тестов: 11 флаконов с СИБ-дисками (СИБ с глюкозой,
лактозой, сахарозой, маннозой, арабинозой, маннитом, инозитом, лизином,
орнитином, аргинином, для определения уреазы) и 2 пробирки с СИБ-полосками (СИБ
для определения оксидазы и индола). СИБ-диски выпускают во флаконах,
СИБ-полоски в пробирках в картонной пачке с инструкцией по применению.
Набор № 1 обеспечивает проведение 50 анализов.
Показания для применения
Идентификация
и дифференциация микроорганизмов рода Vibrio по биохимической активности.
Режим дозирования и способ
применения
Объекты
исследований в санитарной и клинической микробиологии.
ПРОВЕДЕНИЕ
АНАЛИЗА
Основные требования, предъявляемые при работе с набором реагентов «Системы
индикаторные бумажные для идентификации микроорганизмов. Набор №1 для
идентификации вибрионов»:
- исследования проводят с чистой культурой, а также с отдельными колониями с
питательного агара для выделения и культивирования вибрионов;
- погружение дисков в пробирки производят обожженным пинцетом;
- критерием правильности учета реакции должны быть четкие различия в окраске по
сравнению с контролем (за исключением аминокислот, где в опытной пробирке
слабое
зеленое окрашивание свидетельствует об отрицательном результате, в то
время как в
контроле диски с аминокислотами окрашены в желтый цвет);
-для получения четких результатов необходимо соблюдение температурного режима
термостата (37±1) °С, рН применяемых питательных сред и режима обработки:
посуды.
Определение оксидазной активности.
Культуру, выросшую на поверхности питательного агара для культивирования
микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1) °С, растирают
платиновой петлей или стеклянной палочкой на индикаторной полоске СИБ,
помещенной в чашку Петри. На одной полоске можно исследовать 10-14 культур (не
более).
Определение утилизации углеводов и
многоатомных спиртов.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1
суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара
для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1)
°С, затем погружают в пробирку СИБ-диск с соответствующим углеводом или
многоатомным спиртом. Среда в пробирках в результате быстрой диффузии в нее
индикатора становится красной. В случае необходимости учета газообразования
рекомендуется использовать небольшой комочек стерильной гигроскопической ваты,
который помещают в пробирку. В качестве контроля служат СИБ-диски, погруженные
в пробирки со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Пробирки
инкубируют при температуре (37±1) °С.
Определение индолообразования.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1
суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности ииггательного агара
для культивирования мизсроорганизмов в течение 18-24 ч при температур (37±1)
°С. Полоску для определения нндола складывают по намеченной на ней линии вдвое
и пинцетом опускают на дно пробирки так, чтобы длинный бесцветный конец
погрузился в суспензию культуры, а короткий окрашенный: конец находился над
поверхностью суспензии. В качестве контроля используют полоску, помещенную в
пробирку со стерильным натрия хлорида раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Инкубируют
при температуре (37±1) °С.
Определение уреазной активности.
В пробирке с 0,3 мл стерильного натрия хлорида раствора 0,9 % рН 7,3±0,1
суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара
для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1)
°С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с мочевиной. В качестве контроля
используют СИБ-диск, помещенный в пробирку со стерильным натрия хлорида
раствором 0,9 % рН 7,3±0,1. Инкубируют при температуре (37±1) °С.
Определение декарбоксилаз лизина, орнитина и
дегидролазы аргинина.
В
пробирке с 0,3 мл стерильного фосфатно-солевого буферного раствора рН 5,5±0,2
суспендируют полную петлю культуры, выросшей на поверхности питательного агара
для культивирования микроорганизмов в течение 18-24 ч при температуре (37±1)
°С, затем в эту взвесь погружают СИБ-диск с одной из аминокислот: лизином,
орнитином или аргинином и вносят 0,2 мл стерильного вазелинового масла. В
качестве контроля используют СИБ-диски с соответствующими аминокислотами,
погруженные в пробирки со стерильным фосфатно-солевым буферным раствором рН
5,5±0,2 с добавлением 0,2 мл стерильного вазелинового масла. Инкубируют при
температуре (37±1) °С.
Примечание: стерильный натрия хлорида раствор 0,9 % рН 7,3±0,1 готовит
потребитель непосредственно перед использованием.
Регистрацию результатов анализа проводят визуально.